【干货分享】关于大肠杆菌重组蛋白表达系统解答

大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，相对于其他表达体系，算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点：遗传背景清楚；易于培养和控制；转化操作简单；表达水平高；成本低；周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。1：大肠杆菌表达体系的优点是什么？（1）菌体繁殖速度快：20分钟倍增一次，这意味着按照1/100的比例接种（MOI），只需要几个小时培养基细菌即可到达稳定期；（2）容易实现高密度培养：理论培养密度是1×1013c...

【技术服务】常规小鼠源多克隆抗体定制服务

多克隆抗体血清制备抗体的产生，是围绕B淋巴细胞的激活与分化为浆细胞进行的。在shou次免疫过程中，抗原首先经多种免疫相关淋巴或巨噬细胞吞噬充分暴露抗原，并将抗原呈递给静止B淋巴细胞，以使其活化，活化后的B淋巴细胞转化为浆细胞，也就是抗体的产生者。由于抗原的表面存在多种抗原识别决定簇，因此在经过免疫相关细胞加工后，呈递给B淋巴细胞的抗原决定簇也是多种多样的,理论上,-个B淋巴细胞只接受-种抗原决定簇,产生-种对应与之结合的抗体,多个B淋巴细胞就会产生多种识别抗原不同抗原决定簇(...

安诺伦（北京）生物科技有限公司入口网址代理品牌Lumiprobe——高品质活性荧光染料供应商

LumiprobeCorporation品牌logoLumiprobeCorporation是美国一家高品质生物技术公司，专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。从2006年起，公司开始生产并销售生命科学研究和诊断学应用的优质化学药品。主要产品有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreenI染料，定制合成荧光双标记引物。产品主要应用：点击化学（CLickChemistry）、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳（2DDIGE）和实时荧光定量PCR（ReaLtim...

重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量

按操作手册进行，具体步骤如下。一、重组蛋白质的诱导表达1.挑取转化有质粒的单菌落，接种于3ml选择性LB液体培养基中，37oC，250rpm/min振摇培养过夜。2.次日将培养过夜的菌液500μl再接种于10ml（1:::20）选择性LB液体培养基中，37oC，250rpm/min振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取1ml样本作为诱导前标本，10000g离心1min收集菌体沉淀，－20oC冻存备用。3.加入1mol/LIPTG于菌液中，使IPTG终浓度为1mM，37o...

拿来吧你，拯救你的重组蛋白

重组蛋白是应用了重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。用于生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌（大肠杆菌）、哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T细胞治疗靶点、Fc受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。那大家在进行重组蛋白表达时不知道会不会纠结这些问题：该选择什么表达系统？蛋白产量怎么才能有所提高？接下来带你们了解一些常见的外源基因表达系统（包括原核、真核表达系统）以及一...

新手小白细胞转染的注意事项

转染可谓是做生物学实验的大家经常会考虑的一项实验技术，大致原理也都是明白的。但是在实验时经常会遇到转染效率太低，以至于无法进行后续的实验。到底转染是什么呢？为什么转染效率不高呢？其实转染，就是在真核细胞里导入具有生物功能的核酸，并在细胞中维持其生物功能。转染方法的选择我们熟知且常用的转染方法主要有物理介导，化学介导，生物介导。物理介导方法：电穿孔法、显微注射和基因枪；化学介导方法：如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法：有较为原始的原...

安诺伦（北京）生物科技有限公司入口网址销售代理Leading Biology产品试剂*......

BIRC8/ILP2Antibody(N-Terminus)|LBP65960|LeadingBiology品牌LeadingBiology货号LBP65960产地美国价格面询保存条件:存储在2-8°C2周，长期存储20°C,防止冻融循环。英文名:BIRC81ILP2Antibody(N-Terminus)供应商:安诺伦（北京）生物科技有限公司入口网址(北京)生物科技有限公司规格:50ug商品分类:多克隆抗体产品概述:ProtectsagainstapoptosismediatedbyBAX.靶点/蛋白:s...

技术服务|大鼠源单克隆抗体定制服务

单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的免疫动物脾细胞(如小鼠B淋巴细胞)和具有永生功能的肿瘤细胞(如小鼠骨髓瘤细胞)。被特异性抗原免疫的免疫动物脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体能够分泌产生结合抗原特定位置(表位)的抗体,但其自身不能在体外连续培养，具有永生功能的肿瘤细胞(骨髓瘤细胞)则可在培养条件下无限分裂、增殖，即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下，只贿由一个B淋巴细胞与一个骨髓瘤...